第三章 全是脱靶点
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正饶有兴致地观摩着大眼仔的白发老头，缓缓转身，对卢赫微微颔首，“你好，我叫海昼天，很高兴认识你。”
卢赫被按在冰箱上动弹不得，挣扎未果后，回答道：“我认识你不高兴，先回答我，你们把她怎么了？”
“哦，那个小丫头啊，她太闹腾了，只好让她先睡一会儿。”老头微微一笑，“放心，我们是来谈合作的，不会伤害你的员工。”
“你是谁啊，谁要跟你合作？不管你是怎么找来的，赶紧给我滚！否则我报警了啊！”
“哦？报警？你确定吗？你的这间实验室，有经营资质吗？”
“你是个法盲吧，我仪器都是正经厂家那里备过案的，自己用，不经营。退一万步说，宁为玉碎不为瓦全，就算有问题，我也得跟你同归于尽。都什么时代了，还玩儿私闯民宅这一套！我院子里可有监控，说不定物业这会儿就已经报警了，我劝你趁早走，我就当没见过你！”
“哈哈。”缩在角落里摆弄手机的精瘦麻秆冷不丁地笑了一声，激得卢赫起了一身鸡皮疙瘩。
“放心，物业肯定管不了你这事。你最好先冷静一下，然后我们好谈事。谈完了，我自然会走。”老头脸上的笑意更明显了。
卢赫打量着对面的两个人。老头虽然头发全白，但脸上的皱纹并不多，年纪应该不大。玩儿手机的麻秆顶着个爆炸头，一直把脸埋在阴影里，看不清容貌。至于正按着自己的壮汉，不管他相貌几何，卢赫都打不过他。
完全没有反击的机会，他索性做出妥协的样子，口气放软：“好，好。谈，我们谈。你先让他松开我，我颈椎不好一会儿该给我搞晕了。”
老头用眼神示意了壮汉，后者缓缓放开了卢赫。
卢赫活动了一下肩膀，走到菜菜身边探了一下鼻息，然后拉了一把椅子坐了下来，“谈吧。”
老头饶有兴致地点了几下鼠标调出了电脑桌面上的脱靶分析软件，看了几眼，悠悠地转身，“cRISpR-cAS9，简单易学又好用。但它有个缺点，它与靶点的特异性结合需要NGG。火焰龟的碱基序列，你应该很熟悉吧，NGG可不多啊。如果用cRISpR，很容易会脱靶的。所以，你是用了神话核酸酶tALEN还是锌指？”
“tALEN虽然很容易设计，但是组装起来的难度只增不减，细胞毒性又强，还不如锌指。本来给乌龟做导入就已经够难的了，再来点毒性，怕是成功的几率还不如中彩票大。”
“所以呢。”老头慢慢渡步到卢赫面前，俯视着他，“你用的是锌指，对吧？”
卢赫抬眼与老头对视，没有说话。
“在那个锌指技术专利还没有过期的年代，你们那个经费充足出手阔绰的实验室，买下了圣加蒙公司的锌指设计平台。依托这样的资源，你组装了一个完美无缺的锌指结构，敲掉了黑色素表达相关的位点，编辑出了一只通体金黄的火焰龟。”
“你的运气出奇的好，这是个编辑后的突变是双等位基因突变，所以一代编辑龟是个纯合子，它的子一代要么是高系数宽纹，要么是金边大翅膀。我推测的没错吧？南州湾大学里德实验室唯一一位没有顺利毕业的研究生，卢赫。”
“人生在世，要生活下来，总要想法子挣钱。在钱面前，学术什么的，当然就显得不那么重要。你的锌指技术，让你年纪轻轻就过上了这么富裕的生活。凭这一点，我是十分欣赏你的。”
“所以，这位曾经的学术新星，现在的人气龟商。你有没有兴趣，帮我个忙，用你的锌指技术，编辑一下这份基因。”老头说着，从麻秆手中接过一个平板电脑，摆在了卢赫的眼前。
这是一份180mb的基因组。卢赫甚至没有翻页，仅凭大小就猜出这是2000年时被测出全基因组的黑腹果蝇，抬眼道：“怎么了？这有什么特殊的吗？”
“好！果然是当年的高材生。”老头嘴角上扬，“凭这点基本信息，就能知道是哪种生物，基本功很扎实呀。不过呢，关键点不在这里，你继续往下看。”
卢赫不以为然地翻了页，在读完第二页之后，他越翻越快，本是了无兴致的脸上逐渐写满了疑惑与震惊。
这是一份黑腹果蝇的基因组演化报告。果蝇不断被随机用cRISpR-cAS9技术敲除或敲入基因。脱靶分析显示，随着代数的增加，脱靶位点越来越带多，子代的成活率也越来越低。在322代时，子代无一活。
而测序结果更加出乎意料。从300代开始，碱基序列上的NGG就越来越少，无论怎样设计向导RNA，都无法完成与靶点的特异性结合。
而在之后的20代里，即便停止了编辑，NGG也仍然在逐渐减少，直至在322代中，关键位点全部都无法表达造成了细胞死亡。
虽然演化报告里没有附上各个子代果蝇的图片，但卢赫仍然可以想象得到，那些被编辑的后代，一定会长成鬼都不认的样子，存活率极低。想要维持那么多代的话，至少要养几万箱的果蝇。真是吃饱了撑的没事干！
不过这种演化的结果，是让人意想不到的。繁衍的目标是使得种群壮大，根据自然选择理论，存活下来的个体通常会更倾向于携带有利于生存的基因。因此，即便是有外力干涉，子代基因中的NGG也不应该向着越来越少的方向发展啊。这不是自取灭亡吗？
“怎么样？有何感想？”老头收走了平板。
“感想就是，我不知道你们想做什么，也不知道你们想要我做什么。但以我混迹异宠圈多年的经验来看，养熊猫鼠妇就是最离谱的了。相信我，你们这种怪兽果蝇肯定卖不出去的。”
“呵。”老头轻笑一声，“看来生意人的思维挺根深蒂固的了。钱固然是好东西，但也不是做什么事都为了钱。我们的目的不需要你知道。我只想邀请你，帮我在321代上开始用锌指进行随机编辑，让子代继续存活。”
“我做不了，你找别人吧。”卢赫把头一偏，从正襟危坐的姿势切换到二郎腿。他还以为是什么惊天动地地动山摇石破天惊劫财劫色的大事呢，闹了半天是招聘技术员的。
“待遇优厚，不比你卖龟少。”老头特意补充了一句。
“我没兴趣。你这么有钱，随便贴条招聘信息，我保证上门自荐的人能把你家门坎给踏破。”
“选你自然是有原因的，考虑一下吧。”
“我真做不了！”卢赫一脸无奈：“是，我是搞出了个什么通天金的大火焰，但那是我运气好啊。我每没日没夜地霸着测序平台测序，组好锌指之后，又没日没夜地做脱靶分析。你知道我试了多少次吗？2000多次哎！
“爱迪生发明钨丝电灯泡，那也是他没日没夜试出来的。这里面有什么技术含量吗？是他摸摸灯泡灯泡就能亮还是我随便组个锌指它就效率百分百？”
老头听完卢赫的话，笑容逐渐凝固在了脸上。卢赫望着他渐渐变得严肃的表情，重新紧张了起来。
他连忙放下二郎腿，正襟危坐道：“实在抱歉哈，我真就是一无名小卒，不是什么天才。说实话，我爱钱，我爱死钱了。你只要开得比我卖龟多，我打心底里是愿意跟你干的。
可是我没那个本事啊，编辑一个龟就快要我命了，你要是非让我给你弄你那什么高难度果蝇，我能立刻就地死在这儿你信不信？求求您了，放我一马，找别人吧。好吗大哥？”
老头听罢，嘴角开始微微抽搐。旁边抱胸站着的壮汉神情也变得越来越警觉。卢赫的心提到了嗓子眼，他害怕自己见不到明天的太阳。
他目不转睛地注视着老头，希望能得到肯定的答复，可对方的脸抽搐地越来越剧烈。就当他以为自己将要挨揍时，耳边突然传来一声哭腔。
“哥，求你了，你就把这活儿接了吧。”
他随着声音看去，发现角落里的那位精瘦麻秆正在掩面哭泣。
“这问题要解决不了，我们就都活不成了。全人类都活不成了。呜。。。”
这帮人都是神经病吧！卢赫边在心理骂着，边提起自己的气势喊道：“滚！都给我滚！你们玩儿我是不是？私闯民宅人身威胁故弄玄虚的。我负责任地告诉你们，你们要找的人就在斜坡道儿上面的那个八院。那里面个个都是天才说话还好听。给我滚！”
卢赫站起身怒目对着老头，指着细胞间的门大喊，“滚！”
三人灰溜溜地走了。
他畅快地长吐一口气，连忙把菜菜提到了椅子上。
“看着瘦瘦小小的，怎么那么沉啊！”他拍拍菜菜的脸，“醒醒，醒醒啊我的组宗。菜菜！菜长虫！菜长红！”
对方毫无反应。
半个小时以后，缓冲室门口，卢赫表情麻木地从小方桌上拿起了一串羊肉串，机械地嚼着。菜菜还在旁边的椅子上睡着。
他本想把菜菜弄上楼的，可她实在是太沉了。刚刚经历过惊吓、紧张和愤怒的自己实在是搬不动她，所以只好就地守着。
他刚刚跟物业上报了异常，然后查看了院子里的监控。这帮人是有备而来的，进小区用的是正儿八经的门禁，进院子可能是翻墙但监控已经被抹去了。对方了解他的黑历史，也说明他们下了大功夫。
可是为什么呢？怎么就认定这事非他做不可？那个果蝇演化实验又有什么目的呢？
卢赫窝在椅子上抬头望着漆黑的夜空百思不得其解，耳边忽然传来一声吸口水的声音。
“怎么都是羊肉串啊？我不喜欢吃羊肉，我猪蹄呢？”
“真是老天开眼啊我的大小姐你终于醒了，快快快，跟我说说那帮人是怎么进来的。”
菜菜揉着眼睛，有气无力道：“我在细胞间睡觉，突然有陌生人开门。然后我就跟他们打，然后就没有然后了。”
“他们跟你说什么了？”
“他们好像是要说什么，但被我打回去了。”
。。。
这姑娘绝对是大脑被小脑挤没了。
美好的夜晚，被一帮莫名其妙的不速之客折腾没了，好心情一扫而光。卢赫心中充斥着莫名的不详感，随便吃了几口便回房睡觉了。
果然，第二天叫醒他的不是正午的阳光，而是菜菜的尖叫。
“卢哥！金哥不见了！”
正饶有兴致地观摩着大眼仔的白发老头，缓缓转身，对卢赫微微颔首，“你好，我叫海昼天，很高兴认识你。”
卢赫被按在冰箱上动弹不得，挣扎未果后，回答道：“我认识你不高兴，先回答我，你们把她怎么了？”
“哦，那个小丫头啊，她太闹腾了，只好让她先睡一会儿。”老头微微一笑，“放心，我们是来谈合作的，不会伤害你的员工。”
“你是谁啊，谁要跟你合作？不管你是怎么找来的，赶紧给我滚！否则我报警了啊！”
“哦？报警？你确定吗？你的这间实验室，有经营资质吗？”
“你是个法盲吧，我仪器都是正经厂家那里备过案的，自己用，不经营。退一万步说，宁为玉碎不为瓦全，就算有问题，我也得跟你同归于尽。都什么时代了，还玩儿私闯民宅这一套！我院子里可有监控，说不定物业这会儿就已经报警了，我劝你趁早走，我就当没见过你！”
“哈哈。”缩在角落里摆弄手机的精瘦麻秆冷不丁地笑了一声，激得卢赫起了一身鸡皮疙瘩。
“放心，物业肯定管不了你这事。你最好先冷静一下，然后我们好谈事。谈完了，我自然会走。”老头脸上的笑意更明显了。
卢赫打量着对面的两个人。老头虽然头发全白，但脸上的皱纹并不多，年纪应该不大。玩儿手机的麻秆顶着个爆炸头，一直把脸埋在阴影里，看不清容貌。至于正按着自己的壮汉，不管他相貌几何，卢赫都打不过他。
完全没有反击的机会，他索性做出妥协的样子，口气放软：“好，好。谈，我们谈。你先让他松开我，我颈椎不好一会儿该给我搞晕了。”
老头用眼神示意了壮汉，后者缓缓放开了卢赫。
卢赫活动了一下肩膀，走到菜菜身边探了一下鼻息，然后拉了一把椅子坐了下来，“谈吧。”
老头饶有兴致地点了几下鼠标调出了电脑桌面上的脱靶分析软件，看了几眼，悠悠地转身，“cRISpR-cAS9，简单易学又好用。但它有个缺点，它与靶点的特异性结合需要NGG。火焰龟的碱基序列，你应该很熟悉吧，NGG可不多啊。如果用cRISpR，很容易会脱靶的。所以，你是用了神话核酸酶tALEN还是锌指？”
“tALEN虽然很容易设计，但是组装起来的难度只增不减，细胞毒性又强，还不如锌指。本来给乌龟做导入就已经够难的了，再来点毒性，怕是成功的几率还不如中彩票大。”
“所以呢。”老头慢慢渡步到卢赫面前，俯视着他，“你用的是锌指，对吧？”
卢赫抬眼与老头对视，没有说话。
“在那个锌指技术专利还没有过期的年代，你们那个经费充足出手阔绰的实验室，买下了圣加蒙公司的锌指设计平台。依托这样的资源，你组装了一个完美无缺的锌指结构，敲掉了黑色素表达相关的位点，编辑出了一只通体金黄的火焰龟。”
“你的运气出奇的好，这是个编辑后的突变是双等位基因突变，所以一代编辑龟是个纯合子，它的子一代要么是高系数宽纹，要么是金边大翅膀。我推测的没错吧？南州湾大学里德实验室唯一一位没有顺利毕业的研究生，卢赫。”
“人生在世，要生活下来，总要想法子挣钱。在钱面前，学术什么的，当然就显得不那么重要。你的锌指技术，让你年纪轻轻就过上了这么富裕的生活。凭这一点，我是十分欣赏你的。”
“所以，这位曾经的学术新星，现在的人气龟商。你有没有兴趣，帮我个忙，用你的锌指技术，编辑一下这份基因。”老头说着，从麻秆手中接过一个平板电脑，摆在了卢赫的眼前。
这是一份180mb的基因组。卢赫甚至没有翻页，仅凭大小就猜出这是2000年时被测出全基因组的黑腹果蝇，抬眼道：“怎么了？这有什么特殊的吗？”
“好！果然是当年的高材生。”老头嘴角上扬，“凭这点基本信息，就能知道是哪种生物，基本功很扎实呀。不过呢，关键点不在这里，你继续往下看。”
卢赫不以为然地翻了页，在读完第二页之后，他越翻越快，本是了无兴致的脸上逐渐写满了疑惑与震惊。
这是一份黑腹果蝇的基因组演化报告。果蝇不断被随机用cRISpR-cAS9技术敲除或敲入基因。脱靶分析显示，随着代数的增加，脱靶位点越来越带多，子代的成活率也越来越低。在322代时，子代无一活。
而测序结果更加出乎意料。从300代开始，碱基序列上的NGG就越来越少，无论怎样设计向导RNA，都无法完成与靶点的特异性结合。
而在之后的20代里，即便停止了编辑，NGG也仍然在逐渐减少，直至在322代中，关键位点全部都无法表达造成了细胞死亡。
虽然演化报告里没有附上各个子代果蝇的图片，但卢赫仍然可以想象得到，那些被编辑的后代，一定会长成鬼都不认的样子，存活率极低。想要维持那么多代的话，至少要养几万箱的果蝇。真是吃饱了撑的没事干！
不过这种演化的结果，是让人意想不到的。繁衍的目标是使得种群壮大，根据自然选择理论，存活下来的个体通常会更倾向于携带有利于生存的基因。因此，即便是有外力干涉，子代基因中的NGG也不应该向着越来越少的方向发展啊。这不是自取灭亡吗？
“怎么样？有何感想？”老头收走了平板。
“感想就是，我不知道你们想做什么，也不知道你们想要我做什么。但以我混迹异宠圈多年的经验来看，养熊猫鼠妇就是最离谱的了。相信我，你们这种怪兽果蝇肯定卖不出去的。”
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“我做不了，你找别人吧。”卢赫把头一偏，从正襟危坐的姿势切换到二郎腿。他还以为是什么惊天动地地动山摇石破天惊劫财劫色的大事呢，闹了半天是招聘技术员的。
“待遇优厚，不比你卖龟少。”老头特意补充了一句。
“我没兴趣。你这么有钱，随便贴条招聘信息，我保证上门自荐的人能把你家门坎给踏破。”
“选你自然是有原因的，考虑一下吧。”
“我真做不了！”卢赫一脸无奈：“是，我是搞出了个什么通天金的大火焰，但那是我运气好啊。我每没日没夜地霸着测序平台测序，组好锌指之后，又没日没夜地做脱靶分析。你知道我试了多少次吗？2000多次哎！
“爱迪生发明钨丝电灯泡，那也是他没日没夜试出来的。这里面有什么技术含量吗？是他摸摸灯泡灯泡就能亮还是我随便组个锌指它就效率百分百？”
老头听完卢赫的话，笑容逐渐凝固在了脸上。卢赫望着他渐渐变得严肃的表情，重新紧张了起来。
他连忙放下二郎腿，正襟危坐道：“实在抱歉哈，我真就是一无名小卒，不是什么天才。说实话，我爱钱，我爱死钱了。你只要开得比我卖龟多，我打心底里是愿意跟你干的。
可是我没那个本事啊，编辑一个龟就快要我命了，你要是非让我给你弄你那什么高难度果蝇，我能立刻就地死在这儿你信不信？求求您了，放我一马，找别人吧。好吗大哥？”
老头听罢，嘴角开始微微抽搐。旁边抱胸站着的壮汉神情也变得越来越警觉。卢赫的心提到了嗓子眼，他害怕自己见不到明天的太阳。
他目不转睛地注视着老头，希望能得到肯定的答复，可对方的脸抽搐地越来越剧烈。就当他以为自己将要挨揍时，耳边突然传来一声哭腔。
“哥，求你了，你就把这活儿接了吧。”
他随着声音看去，发现角落里的那位精瘦麻秆正在掩面哭泣。
“这问题要解决不了，我们就都活不成了。全人类都活不成了。呜。。。”
这帮人都是神经病吧！卢赫边在心理骂着，边提起自己的气势喊道：“滚！都给我滚！你们玩儿我是不是？私闯民宅人身威胁故弄玄虚的。我负责任地告诉你们，你们要找的人就在斜坡道儿上面的那个八院。那里面个个都是天才说话还好听。给我滚！”
卢赫站起身怒目对着老头，指着细胞间的门大喊，“滚！”
三人灰溜溜地走了。
他畅快地长吐一口气，连忙把菜菜提到了椅子上。
“看着瘦瘦小小的，怎么那么沉啊！”他拍拍菜菜的脸，“醒醒，醒醒啊我的组宗。菜菜！菜长虫！菜长红！”
对方毫无反应。
半个小时以后，缓冲室门口，卢赫表情麻木地从小方桌上拿起了一串羊肉串，机械地嚼着。菜菜还在旁边的椅子上睡着。
他本想把菜菜弄上楼的，可她实在是太沉了。刚刚经历过惊吓、紧张和愤怒的自己实在是搬不动她，所以只好就地守着。
他刚刚跟物业上报了异常，然后查看了院子里的监控。这帮人是有备而来的，进小区用的是正儿八经的门禁，进院子可能是翻墙但监控已经被抹去了。对方了解他的黑历史，也说明他们下了大功夫。
可是为什么呢？怎么就认定这事非他做不可？那个果蝇演化实验又有什么目的呢？
卢赫窝在椅子上抬头望着漆黑的夜空百思不得其解，耳边忽然传来一声吸口水的声音。
“怎么都是羊肉串啊？我不喜欢吃羊肉，我猪蹄呢？”
“真是老天开眼啊我的大小姐你终于醒了，快快快，跟我说说那帮人是怎么进来的。”
菜菜揉着眼睛，有气无力道：“我在细胞间睡觉，突然有陌生人开门。然后我就跟他们打，然后就没有然后了。”
“他们跟你说什么了？”
“他们好像是要说什么，但被我打回去了。”
。。。
这姑娘绝对是大脑被小脑挤没了。
美好的夜晚，被一帮莫名其妙的不速之客折腾没了，好心情一扫而光。卢赫心中充斥着莫名的不详感，随便吃了几口便回房睡觉了。
果然，第二天叫醒他的不是正午的阳光，而是菜菜的尖叫。
“卢哥！金哥不见了！”